《表4 基因检测所用引物:虹鳟弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定与多位点序列分型》
分离菌基因组的提取步骤按照通用型细菌DNA提取试剂盒说明书,将提取的细菌DNA模版4℃保存,为下游实验做准备。参照文献(杨鸢劼等,2005)使用16S rRNA基因通用引物(27F/1492R)预计扩增片段大小为1 500 bp(表4)。反应体系:2×Taq PCR Master Mix 25μL、10 mol/μL的上、下游引物各2.5μL,5μL模版DNA,15μL ddH2O。反应条件:预变性94℃5 min;变性94℃30 s,退火55℃45 s,延伸72℃90 s,共30个循环;终延伸72℃10 min。结果经电泳确认,PCR产物送上海生工生物工程(上海)股份有限公司测序。测序结果在NCBI与EzBioCloud两个数据库进行同源性比对分析。
图表编号 | XD00147624300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.25 |
作者 | 张明洋、胡安东、程振涛、姜海波、文明 |
绘制单位 | 贵州大学动物科学学院、贵州大学动物科学学院、贵州大学动物科学学院、贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室、贵州大学动物科学学院、贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室、贵州大学动物科学学院、贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室 |
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