《表1 各基因引物：弗氏柠檬酸杆菌耐药性及产Ampc酶基因型分析》

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《弗氏柠檬酸杆菌耐药性及产Ampc酶基因型分析》

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上述产Ampc酶菌落培养过夜后，用双蒸水中混悬成菌落悬液，煮沸裂解后提取全DNA，100℃水浴15 min后冰浴5 min，12 000 r/min离心10 min，收集上清液，将菌落DNA与各组引物一起置于PCR扩增反应混合体系中扩增Ampc酶相关基因，各基因引物如表1中所示，PCR反应条件:95℃预变性3 min，后95℃55 s、56℃45 s、72℃55 s共循环35次，最后72℃再延伸5 min，终产物滴于1.0%琼脂糖凝胶上电泳，验证扩增的目的条带。