《表1 引物序列：牛源乳腺致病性大肠杆菌JL05全基因测序及毒力和耐药基因分析》

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《牛源乳腺致病性大肠杆菌JL05全基因测序及毒力和耐药基因分析》

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根据Clermont等方法对E.coli JL05进行四重PCR检测[8]，扩增arp A、chu A、Tsp E4.C2和Yja A基因，引物序列见表1。PCR反应体系：2×Super Fi II Green PCR Master Mix 25μL，0.5μmol/L的上下游引物各0.5μL，DNA模板2μL，加NucleaseFree Water至50μL。PCR反应条件：98℃30 s；98℃10 s、60℃10 s、72℃30 s，共30个循环；72℃5 min。扩增后在Experion自动电泳系上电泳，判定分群结果。