《表1 引物序列信息:鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性检测及耐药基因分析》

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《鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性检测及耐药基因分析》


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以煮沸法制备的鸭源多杀性巴氏杆菌DNA为模板,根据参考文献[9-10]中的引物序列(表1),扩增3个磺胺类耐药基因sul1、sul2和sul3。PCR扩增体系25μL:2×Taq PCR Mix 12.5μL,上、下游引物(20μmol/L)各0.5μL,DNA模板1μL,灭菌去离子水补足体系。PCR反应程序:94℃预变性5min;94℃变性45s,退火(退火温度见表1)30s,72℃延伸45s,共30个循环;72℃延伸10 min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后,随机选取3个基因的阳性扩增产物送至铂尚生物技术(上海)有限公司测序进行纯化并双向测序,输入NCBI中进行BLAST同源性比对。