《表1 各引物的详细信息:禽源多杀性巴氏杆菌拓扑异构酶基因突变与耐恩诺沙星的相关性》

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《禽源多杀性巴氏杆菌拓扑异构酶基因突变与耐恩诺沙星的相关性》


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根据鸡源多杀性巴氏杆菌FDAARGOS_216株的DNA topoisomerase subunit基因和DNA topoisomeraseⅣsubunit A基因序列(CP020403),设计两对引物见表1,由铂尚生物技术(上海)有限公司合成,分别配成10μmol/L。配制50μL的PCR反应体系,其中Dream Taq Green PCR Master Mix(2×)25μL、上下游引物各1μL、模板1μL、ddH2O 22μL。PCR反应条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,相应退火温度退火40 s,72℃延伸30 s,共30个循环,最后72℃延伸10 min。凝胶检测PCR产物,将产物送铂尚生物技术(上海)有限公司测序。