《表2 耐旱相关基因表达分析用引物》

《表2 耐旱相关基因表达分析用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《水稻品种‘扬稻二号’与‘扬稻六号’的抗旱性差异分析》


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耐旱相关基因的表达分析:根据已公布的日本晴(Oryza Sativa)基因组序列和93-11序列获取各基因的mRNA序列,用https://sg.idtdna.com/scitools/Applications/RealTimePCR/这个网站选取跨内含子的引物,内参基因选择OsActin(NCBI登录号:AB047313),列出所用的基因具体信息及引物序列(表2)。PCR反应体系(20μL)包含:cDNA模板1μL,10×PCRBuffer2μL,dNTPs(10 mmol/L)0.5μL,正反向引物(10μmol/L)0.5μL,DNA聚合酶(全式金,北京)0.5μL以及去离子水15.5μL。PCR反应程序为:95℃预变性5 min,95℃变性30 s,56℃退火30 s,72℃延伸30 s,25个循环,72℃延伸5 min,之后4℃保存。1.0%琼脂糖电泳检测,凝胶电泳结果使用BIO-RAD分子照胶系统扫描。扫描后图片用Photoshop 7.0进行条带的灰度分析,将OsActin的表达量设置为100,其他基因的表达量定义为该基因的条带亮度值占OsActin条带亮度值的百分比。