《表1 试验用引物：棉铃虫鞣化激素β亚基参与脂肪组织免疫的相关功能基因表达模式》

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《棉铃虫鞣化激素β亚基参与脂肪组织免疫的相关功能基因表达模式》

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以棉铃虫cDNA为模板，根据棉铃虫鞣化激素β亚基和EGFP序列设计普通PCR扩增引物和含有T7启动子（斜体）序列的RNAi引物（表1）。合成方法参照姚雪等[15]（2019）方法，首先用不含T7启动子的引物进行第一轮PCR扩增，电泳检测，将并PCR产物纯化，切胶回收后将待干扰基因Burs-β片段与pMD19-T载体连接，对照采用实验室保存的含有EGFP基因片段序列的表达载体p NUS-EGFPcH（质粒中EGFP的GenBank登录号AY056838），通过蓝白斑筛选，经测序验证正确后备用。接下来分别以含有Burs-β与EGFP目的片段的p MD19-T质粒为模板，分别以含有T7启动子序列的Burs-β与EGFP引物进行PCR扩增，连接pMD-19T载体，通过蓝白斑筛选，经测序验证正确后作为模板，以含有T7启动子的引物进行PCR扩增，并纯化PCR产物，然后用MEGA script RNAi Kit（ABI公司）进行体外转录，合成的Burs-β与EGFP dsRNA片段-20℃保存以备RNAi试验用。表1