《表1 试验所用引物：保幼激素诱导尖唇散白蚁兵蚁分化的特征及其相关基因的表达谱》

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《保幼激素诱导尖唇散白蚁兵蚁分化的特征及其相关基因的表达谱》

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采用荧光定量PCR技术检测保幼激素信号相关基因Met、Kr-h1、Br-C和USP的表达。用120、160和200μg/m L浓度的吡丙醚在7月对工蚁进行诱导，取诱导获得的前兵蚁20头，切下头部置于Trizol中研磨，再加氯仿、异丙醇抽提总RNA。根据反转录试剂盒说明书反转录合成c DNA，-20℃保存备用。荧光定量PCR所用引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，以β-actin为内参基因（表1）。20μL PCR反应体系：SYBR Premix Ex TaqTM(2×）10μL、10μmol/L正反向引物各1μL、DNA模版1μL，加dd H2O至20μL。反应条件：95℃预变性2 min；95℃变性15 s，60℃退火延伸20 s，40个循环，记录熔解曲线，采用2-ΔΔCt法计算各基因的相对表达量。同时用160μg/m L保幼激素Ⅲ在7月对工蚁进行诱导，检测诱导获得的前兵蚁Met、Kr-h1、Br-C和USP的表达情况，方法同上。