《表3 基因引物序列：鸭油甘油二酯和维生素D_3对结肠炎大鼠结肠菌群、脾脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达量及结肠组织发育的影响》

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《鸭油甘油二酯和维生素D_3对结肠炎大鼠结肠菌群、脾脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达量及结肠组织发育的影响》

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选取各脾脏样品50 mg，加入1 mL的TRNzol(Roche）试剂粉碎匀浆后抽提RNA。使用BioPhotometer型核酸蛋白测定仪测定其浓度和纯度，将检验合格的RNA用反转录试剂盒逆转录成cDNA用于mRNA表达量测定试验。cDNA合成条件37℃，15 min；85℃，5 s。按照日本TaKaRa公司SYBR Premix Ex TaqⅡ试剂盒的说明，采用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行靶基因mRNA表达量的检测。以3-磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）为内参基因，引物由生工生物（上海）有限公司合成。使用2-ΔΔCt法计算目的基因mRNA相对于内参基因GAPDH的表达量。基因引物序列见表3。