《表1 PCR引物:IL-37、IFN-γ和IL-10在类风湿关节炎中的表达水平及其临床意义》

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《IL-37、IFN-γ和IL-10在类风湿关节炎中的表达水平及其临床意义》


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采集类风湿关节炎患者及健康人外周血各2m L。加入分层液后离心,吸出单核细胞层。24孔板培养2 h后加脂多糖(LPS)刺激,24 h后收集上清,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组IL-37、IFN-γ、IL-10水平;裂解细胞,实时荧光定量PCR检测IL-10、IFN-γmRNA表达水平。进一步加入IL-37抗体,检测IL-10、IFN-γ蛋白及mRNA表达水平。人IL-37 ELISA试剂盒由武汉华美生物工程有限公司提供,人IL-10、IFN-γELISA试剂盒由美国Biolegend公司提供,实时定量PCR试剂盒由toyobo公司提供,PCR引物由Invitrogen公司提供(表1)。人IL-37抗体由R&D公司提供,严格按照试剂盒说明书操作。