《表1 引物名称及序列：肺结核患者外周血CD_8~+ T细胞中IFN-γ和miR-365a表达关系及意义》

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《肺结核患者外周血CD_8~+ T细胞中IFN-γ和miR-365a表达关系及意义》

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用miRNeasy Mini RNA提取试剂盒（德国QIA-GEN公司）提取外周血中CD8+T细胞中总RNA，经Nano Drop定量仪（美国基因公司）调整RNA浓度，按照mi Script逆转录试剂盒（德国QIAGEN公司）说明书在DNA Enginer Peltier热循环仪（美国Bio-Rad公司）中进行逆转录反应合成cDNA。用实时荧光定量PCR仪（美国ABI公司）检测cDNA中miR-365a水平。反应体系为:c DNA模板2μL、水8.5μL、SYBR Green 12.5μL、上游引物1μL、下游引物1μL（大连TaKaRa公司），引物序列（见表1）。反应条件为:预变性95℃10 s；变性95℃5 s，延伸60℃20 s，共40个循环。U6为内参基因，通过Ct值计算miR-365a表达水平相对表达水平RQ=2-△△Ct，其中△Ct=Ct目标-Ct内参，△△Ct=△Ct实验组-△Ct对照组。