《表1 引物序列：PCOS合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型和CD4~+CD25~+调节性T细胞研究》

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《PCOS合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型和CD4~+CD25~+调节性T细胞研究》

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采用RT-PCR法。外周血单个核细胞总RNA提取采用Trizol法，具体按照试剂盒说明书操作。提取的总RNA经DU800紫外分光光度计测定A260/A280比值在1.8～2.0用于后续试验。逆转录操作严格按试剂盒说明书进行。所需引物均由上海生工生物工程公司设计并合成，序列见表1。20μl PCR反应体系中含有上游引物900 nmol/L，下游引物300 nmol/L，c DNA 2μl，Universal Master Mix 10μl。扩增条件：94℃预变性2 min，再用二步法进行扩增：94℃10s，60℃30 s，共反应40个循环。计算目的基因m RNA相对表达量，计算公式为2-ΔΔCt。