《表1 引物序列：外周血中clusterin和septin-9及CA125在卵巢癌患者中的表达及其意义》

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《外周血中clusterin和septin-9及CA125在卵巢癌患者中的表达及其意义》

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（1） 抽取患者外周血于4℃条件下，1 500g离心力下离心15min，取上层血浆分装保存于-80℃冰箱以备用。（2）采用qRT-PCR方法检测基因表达水平采用TRIZOL试剂提取总RNA。采用逆转录试剂盒合成cDNA。以β-catin为内参基因，采用ABI 7 300型PCR仪将转录成的cDNA在50℃、2 min，95℃、15 min，95℃、15s，60℃、1min，共40个循环条件下扩增。每次循环均设空白对照，计算目的基因mRNA的相对表达量，每组重复3次取均值。PCR产物采用2%琼脂糖凝胶电泳分析并鉴定。基因相对表达量采用△△Ct法进行计算，△△Ct=（Ct目的基因-Ctβ-catin）观察组-（Ct目的基因-Ctβ-catin）对照组，观察组标本相对表达量为2-△△Ct。引物序列见表1。（3）按照ELISA试剂盒说明书，分别检测血浆中clusterin和septin-9蛋白水平。