《表1 qPCR引物序列：维生素B2在胃癌中的作用及机制研究》

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《维生素B2在胃癌中的作用及机制研究》

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药物处理24 h后收集细胞，PBS清洗3次。按500μL/孔加入TRIzol裂解细胞，提取细胞总RNA，逆转录试剂盒将总RNA逆转录成c DNA。应用SYBRGreen试剂进行q PCR检测，反应条件：95℃预变性5 min；95℃变性10 s，59～62℃退火30 s，72℃延长30 s，共40个循环；72℃延伸10 min。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）作为内参，引物序列见表1。采用2-ΔΔCt法计算己糖激酶Ⅱ（HKⅡ）、丙酮酸激酶M2(PKM2）和GLUT1 m RNA表达水平。实验重复3次，取均值。