《表1 所用基因引物序列:维生素E促进小鼠H-22移植瘤的作用及机制》

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《维生素E促进小鼠H-22移植瘤的作用及机制》


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引物设计与合成、RNA提取与逆转录参考笔者实验室前期研究工作[12]。本研究所用的基因引物序列总结于表1。将肿瘤和肝脏组织各自放入无酶离心管,放入小磁珠和Tritol,置于组织匀浆机裂解。裂解液利用氯仿/Trizol抽提,用超微量酶标仪测RNA的OD值。按照逆转录试剂盒(Takara公司)操作去除基因组DNA,逆转录成c DNA。PCR采用10μL反应体系,具体循环参数见笔者实验室前期研究工作[12]。检测肿瘤和肝脏组织中相关基因的表达水平,融解曲线用来保证扩增产物的特异性。每个基因表达水平的检测不少于3次。