《表1 引物序列及产物：桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制》

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《桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制》

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按照TRIzol试剂盒提取纯化操作方法提取肝脏组织总RNA，所得的RNA进行完整性及纯度测定。按反转录试剂盒说明书将RNA反转录成c DNA第一链，再进行PCR扩增。q PCR体系10?μL:SYBR?Green?I?4.2?μL、上游引物0.3?μL、下游引物0.3?μL、H2O?4.2?μL、c DNA?1?μL。引物由生工生物工程（上海）股份有限公司设计并合成，如表1所示。反应条件：95℃、4 min预变性；95℃、15 s变性，55～60℃、30 s退火，共40个循环。以β-actin作内参基因，分别测定肝组织TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、TIMP-1、MMP-13 m RNA相对表达量，结果以2-△△Ct表示。