《表1 引物序列：玛咖对免疫抑制-脾虚证小鼠能量代谢及免疫调节机制研究》

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《玛咖对免疫抑制-脾虚证小鼠能量代谢及免疫调节机制研究》

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5.RT-q PCR法测脾脏中IL-2、IFN-γm RNA表达 每组取3只小鼠脾脏组织按Trizol试剂说明提取总RNA，总RNA经1%的琼脂糖凝胶电泳确定其完整性，采用紫外分光光度计检测总RNA的含量和纯度。取3μg总RNA逆转录为c DNA，再依照试剂盒说明在50μL反应体系中进行PCR扩增。同时做溶解曲线以确认是否是单一峰。反应结束后，通过琼脂糖凝胶电泳确认扩增产物是否符合原设计片段长度。PCR反应及数据采集在Light Cycler 2.0系统上进行，记录其循环阈值（CT），基因表达结果采用相对定量公式2-△△CT计算，其中△（Ct）值=靶基因的（Ct）值-β-actin的（Ct）值。测定脾脏组织IL-2、IFN-γm RNA表达水平。利用引物和探针设计软件Primer5.0设计引物序列。所用的引物及内参照β-actin引物如表1所示。