《表1 引物序列：人参皂苷Rg1联合重组大肠杆菌不耐热肠毒素rLTB作为滴鼻免疫佐剂在小鼠体内的作用研究》

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《人参皂苷Rg1联合重组大肠杆菌不耐热肠毒素rLTB作为滴鼻免疫佐剂在小鼠体内的作用研究》

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参照文献[6]采集小鼠脾脏并分离脾细胞，调整细胞浓度为5×106个/m L，并接种到24孔板中，每孔2 m L，置于37℃，5%CO2培养箱孵育2 h；加入终浓度为100μg/m L的OVA抗原刺激后，置于37℃，5%CO2培养24 h；裂解细胞，收集裂解液并按照试剂盒说明书提取总RNA；反转录后利用染料法进行荧光定量PCR，详细步骤参照文献[18]。利用软件Primer Express 3.0设计引物序列，并由上海生工生物工程技术服务有限公司合成（表1）。以生理盐水组为校准样本，其它组为待测样本，采用2-△△CT法相对定量分析各细胞因子转录水平。