《表1 引物序列表:桂圆益气补血汤与不同剂量龙眼肉多糖配伍用药对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响》

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《桂圆益气补血汤与不同剂量龙眼肉多糖配伍用药对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响》


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提取脾淋巴细胞总RNA,逆转录为cDNA,进行PCR扩增反应。PCR反应条件:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,最适退火温度(Tm)退火30 s,72℃延伸50 s,共35个循环;最后72℃延伸7 min。IL-2、IFN-γ和IL-4的Tm值分别为55℃、56℃、58℃,内参β-actin为55~60℃。用琼脂凝胶电泳对PCR产物进行分析。称取0.8 g琼脂糖制备琼脂糖凝胶,待其冷却后置于电泳槽中加样。将5μL的PCR产物和1μL loading buffer加入到每个琼脂凝胶点样孔中。电泳条件设置为90 V、25 min,最后在凝胶成像系统上拍照分析[10]。引物序列见表1。