《表2 引物序列及序列号：橡胶籽油对脂多糖刺激蛋鸡产蛋性能、肠道形态和免疫功能的影响》

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《橡胶籽油对脂多糖刺激蛋鸡产蛋性能、肠道形态和免疫功能的影响》

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采集血液后的蛋鸡，用手术剪刀打开腹腔，无菌操作取出少许肝脏、脾脏和回肠中段组织，分别置于灭菌的1.5 m L冻存管中，立即保存于-196℃液氮速冻后转移到-80℃冰箱中，采用SYBR Green实时荧光定量RT-PCR法测定IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB基因m RNA表达量，并用核酸测定仪（Nanodrop?ND-2000）测定总RNA纯度和浓度，然后应用反转录试剂盒（Ta Ka Ra公司，日本）获取c DNA，-80℃保存待用。按照SYBR Premix Ex TaqTM(Ta Ka Ra公司，日本）试剂盒说明书进行荧光定量PCR，反应仪器为7500荧光检测系统（Applied Biosystems）。PCR扩增完成后用熔解曲线和琼脂糖凝胶电泳法分析验证产物的特异性。炎症基因IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB和内参基因GAPDH的引物序列见表2，基因表达的结果采用2-△△CT法进行分析。