《实时荧光定量引物序列:饲粮添加谷氨酰胺对黔东南小香鸡生长性能、免疫性能及肠道黏膜免疫的影响》

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《饲粮添加谷氨酰胺对黔东南小香鸡生长性能、免疫性能及肠道黏膜免疫的影响》


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利用RNAiso Plus试剂(产品编号:D9108A,TaKaRa公司,日本)进行空肠黏膜总RNA的提取,操作步骤按照试剂说明进行。利用微量分光光度计将提取的RNA进行浓度测定。根据NCBI数据库进行肠道黏膜MUC1及MUC2引物的设计(引物序列如表2所示)。实时荧光定量PCR检测采用SYBR Green染料法,在CFX ConnectTM PCR仪器上进行,SYBR Premix Ex Taq试剂盒购自TaKaRa公司,操作步骤按试剂盒说明书操作,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参。基因表达水平的计算参照Livak等[10]的方法进行。所有样品测定3次。