《表3 引物序列：菌酶协同发酵饲粮对仔猪生长性能、养分消化率、血清生化指标和肠道屏障功能的影响》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《菌酶协同发酵饲粮对仔猪生长性能、养分消化率、血清生化指标和肠道屏障功能的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

总RNA的提取按照试剂盒（Trizol Reagent，TaKaRa，日本）操作说明进行，RNA质量检测使用核酸蛋白检测仪（Beckman DU-800，CA，美国）于260 nm检测，A260/A280表示RNA的纯度，该比值在1.8～2.0说明RNA纯度较好。cDNA的合成按照逆转录试剂盒（Prime ScriptTMRegent Kit，TaKaRa，日本），反应结束后-20℃保存待用。利用美国国家生物技术信息中心（NCBI）搜索基因序列，运用Primer 5进行引物设计，由上海生工生物工程公司合成，引物序列见表3。用实时荧光定量PCR仪（ABI7900HT real-time PCR System，ABI，美国）进行测定，反应荧光染料为SYBR GreenⅠ（TaKaRa，日本）。反应体系为10.0μL:5.0μL SYBR Premix Ex TaqTMⅡ（2×）、0.5μL上游引物、0.5μL下游引物、3.0μL双蒸水和1.0μL cDNA模板。选择β-肌动蛋白（β-actin）作为空肠和回肠黏膜的内参基因，使用2-ΔΔCt方法计算目的基因相对表达量。