《表1 引物序列表：辣木多肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化功能的影响》

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《辣木多肽对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化功能的影响》

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Trizol试剂盒法提取肝脏组织中总RNA，紫外分光检测提纯后的RNA浓度用于后续实验。取总RNA（2μg）加入d NTPs（1μL）、Oligod T18引物（1μL）、MLV逆转录酶（1μL）、RNases抑制剂（1μL）及5×Buffer（10μL）逆转录成c DNA。取适量c DNA（2μL）用q RT-PCR法检测Mn-SOD、Gu/Zn-SOD和CAT的表达水平。在总反应体系中（20μL）加入上游和下游引物（10μmol/L）各1μL、2×SYBR Premix Ex Taq II（10μL）、50×ROX reference Dye（0.4μL）和灭菌双蒸水（5.6μL），充分混匀后置于Quant Studio TM 6 Flex PCR仪中进行反应。扩增反应条件为95℃30 s，95℃25 s，55℃25 s，72℃50 s，共35～40个循环，72℃延伸5 min。每个基因c DNA样本平行扩增3次，取Ct值均数，依公式计算目的基因表达量[F=2（检测样品中基因的Cr值-检测样品中持家基因的Cr值）/2（空白样品中基因的Cr值-空白样品中持家基因的Cr值）]。相关基因的引物序列见表1所示。