《表1 PCR引物序列：基于能量代谢探讨黄芪颗粒对H22荷瘤小鼠化疗增效的作用机制》

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《基于能量代谢探讨黄芪颗粒对H22荷瘤小鼠化疗增效的作用机制》

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mRNA表达水平按TRIzol RNA提取试剂盒说明书进行总RNA的提取，检测RNA含量和纯度（A260/A280=1.8～2.0）。采用Promega逆转录试剂盒进行逆转录反应，反应条件为:25℃5 min，42℃60 min，70℃5 s，4℃保持。然后进行PCR反应，反应体系为20μL；反应条件:预变性95℃30 s；PCR 95℃5 s，55℃30 s，72℃30 s，40个循环；熔解曲线95℃10 s，55℃30 s，95℃10 s。扩增反应后进行熔解曲线分析，判断产物是否有非特异性扩增；分析扩增曲线，计算Ct值；以β-actin为内参基因，采用2-△△Ct方法计算各组mRNA相对表达水平，实验重复3次。引物合成由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，序列见表1。