《表1 引物名称及序列：DDAH1对心肌梗死大鼠心室的重构作用及机制》

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《DDAH1对心肌梗死大鼠心室的重构作用及机制》

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分别于第7、14、28天进行取材。打开胸腔，将心脏迅速剪下，生理盐水冲洗残余血液，滤纸吸干水分，分离附着组织后立即置于-20℃冰箱保存。麻醉大鼠后使用彩色超声诊断仪检测大鼠的心脏功能，探头频率为12～14 MHz，并记录左室收缩末期内径（LVESD）及左室舒张末期内径（LVEDD），利用超声心动图计算左室射血分数（LVEF），取连续3个心动周期的平均值。使用Trizol法提取组织总RNA，按100 mg/ml加入Trizol，各组取16μl总RNA，逆转录总体积40μl体系，以逆转录后的cDNA为模板，按照试剂盒说明书加入相关试剂（蒸馏水6.4μl、mix 10μl、上游引物0.8μl、下游引物0.8μl、样品溶液2μl），终体积为20μl，扩增条件:95℃预变性10 min，95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸60 s，共35个循环，将正常组设定为1，以7500型PCR热循环仪分析软件，相对定量RQ值用于统计分析。引物名称及序列见表1。严格按照BCA法蛋白质浓度测定试剂盒说明书操作进行组织蛋白的提取，蛋白上样量每个泳道为40μg。SDS-PAGE凝胶的制备严格按照试剂盒说明书操作，Image J软件分析各组条带，将各组整合灰度值与内参比较（目的蛋白ID/内参ID）即得eNOS、s GC蛋白的相对表达量。