《表2 干扰序列表：齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体构建》

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《齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体构建》

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根据齐口裂腹鱼PGC-1α基因序列，利用Invitrogen公司的siRNA在线设计软件（https:∥rnaidesigner.invitrogen.com/rnaiexpress/）设计两对寡核苷酸干扰靶位点组合（表2），然后退火形成双链（10×PCR Buffer 1μL，10μmol/L的上、下游干扰序列各1μL，加水至10μL，经过95℃4min，70℃10min）。随后与被XhoⅠ/BamHⅠ双酶切的线性化的pSioR-GFP载体用T4连接酶连接（10×buffer 1μL，T4DNA Ligase 1μL，Vector 1μL，Anneal product 7μL，20℃1h）转化DH5α，挑取阳性克隆经PCR验证后送交公司测序，检测引物PsicoR见表1。