《表1 引物序列:急性肝衰竭模型猪微环境对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响》

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《急性肝衰竭模型猪微环境对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响》


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注:alkaline phosphatase:碱性磷酸酶;osteopontin:骨桥蛋白;PPARy2:过氧化物酶体增殖物激活受体;LPA:脂蛋白;Aggrecan:聚蛋白多糖;Col II:II型胶原蛋白;ALB:白蛋白;G6PD:葡糖糖-6-磷酸脱氢酶;HNF1A:肝细胞核因子-1A;HNF1B:肝细胞核因子-1B;HGF:肝细胞生长因子;GAPDH:甘油醛-3-

诱导结束后用Trizol法提取细胞总RNA,RT-qPCR检测成骨、成脂、成软骨特异性标记物的表达。按照TaKaRa逆转录试剂盒说明书将RNA逆转录成cDNA(引物序列见表1)。qPCR采用UltraSYBR Mixture(Low ROX)说明书进行操作,反应条件如下:预变性:95℃10min,变性:95℃15s,退火延伸:60℃1min,40个循环。以GAPDH为内参基因,NorADMSCs和ALF-ADMSCs未分化细胞为对照组,计算两组细胞成骨、成脂、成软骨待测基因2-ΔΔCt值并进行数据处理,每组实验至少重复3次。