《表1 引物序列:几丁质酶编码基因FolCTS3参与调控尖孢镰刀菌几丁质酶活性和致病力的研究》

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《几丁质酶编码基因FolCTS3参与调控尖孢镰刀菌几丁质酶活性和致病力的研究》


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采用Split-marker PCR方法构建FolCTS基因敲除载体。用于PCR扩增目的基因、基因上下游、潮霉素(HPH)、诺尔丝菌素(NAT)片段的引物如表1所示。将PCR片段纯化后转入野生型菌株Fol4287原生质体中,并在琼脂筛选培养基中加入潮霉素B或诺尔丝菌素,工作浓度为300μg·mL-1,用于转化子的筛选。原生质体转化参照Zhang等[14]方法进行。