《表1 目的基因引物序列：大鼠深Ⅱ度烫伤模型的建立及分子指标的检测》

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《大鼠深Ⅱ度烫伤模型的建立及分子指标的检测》

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（3）RT-PCR检测烫伤组织中CK19、VEGF、胶原I和胶原III的表达情况。（1）引物设计：参考基因库序列，由上海生物工程技术股份有限公司合成（表1）。（2）RT-PCR扩增皮肤组织CK19、VEGF、胶原I和胶原III的cDNA：取创面和正常皮肤组织，按RNA抽提程序进行总RNA的提取；取总量5 000 ng的RNA，分别加入15 mmol/L OligodT 1μL、5×RT缓冲液4μL、10 mmol/L d NTPs 2μL、1μL RNA酶抑制剂和逆转录酶ReverTra Ace 1μL，加双蒸水至总体积20μ:，于42℃60 min～70℃5 min获得cDNA模板；取1μL cDNA作为模板，用上述特异性引物进行PCR扩增：扩增体积为25μL，目的基因扩增35个循环，β-actin扩增30个循环。PCR产物加至1.5%琼脂糖凝胶中电泳，EB染色后于凝胶成像系统中分析鉴定。