《表1 目的基因及内参基因的引物序列》

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《黄精对衰老大鼠内皮祖细胞DNA损伤检测点ATM/ATR通路的影响》

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Trizol法提取各组细胞的总RNA，先按第一链cDNA合成试剂盒说明进行扩增，用20μL反应体系:5×Prime Script Buffer 4μL，Prime Script RT Enzyme Mix I 1μL，Oligo dT Primer 1μL，RNA1μg，加入RNase Free d H2O使体积达到20μL；反应条件:37℃反转录15 min，85℃5 s终止反应。接着，按荧光定量PCR试剂盒操作说明进行，反应体系:SsoFast EvaGreen Supermix 10μL，上游引物1μL，下游引物1μL，RNase/DNase free water 6μL，cDNA Template 2μL；反应条件:95℃预变性30 s后，95℃5 s，60℃34 s扩增40个循环，以β-actin为内参。目的基因和内参β-actin引物由上海生工设计，见表1。以目的基因和内参基因的比值表示目的基因的相对表达量。