《表1 所用引物序列信息:葡萄转录因子VpSBP12的克隆及功能分析》

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《葡萄转录因子VpSBP12的克隆及功能分析》


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注:引物中下划线表示酶切位点。Note:The underline in the primer indicates the restriction site.

设计含有酶切位点但不带终止密码子的特异引物(表1),扩增VpSBP12基因的开放阅读框并连接至pBI221-GFP。将酶切鉴定正确的重组质粒送去TaKaRa公司测序。将测序正确的质粒制备微弹后利用基因枪法轰击洋葱表皮,室温下在高渗培养基中暗培养12~16h后,转入等渗MS培养基继续培养24h左右后,用镊子取下平铺于载玻片上,在激光共聚焦荧光显微镜下进行观察。绿色荧光激发光波长为488nm,发射波长为505~530nm。