《表1 所用引物序列:柑橘溃疡病抗性相关转录因子CitMYB20的功能》

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《柑橘溃疡病抗性相关转录因子CitMYB20的功能》


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按照植物RNA快速提取试剂盒说明书提取晚锦橙、枣阳小叶枳和金弹金柑成熟叶片的总RNA,进行反转录获得c DNA模板。使用Cit MYB20-F和Cit MYB20-R引物对(表1),在高保真酶Prime STAR?Max DNA Polymerase作用下,94℃3 min;94℃30 s,58℃30 s,72℃1 min,35个循环;72℃延伸3 min获得PCR产物。经加poly(A)尾,胶纯化回收等操作后,将PCR产物与T载体连接,热击法转化感受态DH5α。挑选菌液PCR检测阳性的克隆送至擎科生物技术有限公司测序。