《附表1 引物序列表:谷子抗锈病反应相关MYB转录因子的鉴定与表达》
采用Trizol试剂(Thermo Fisher Scientific,15596-026),提取不同处理条件下取材的谷子样品的总RNA,第一链c DNA的合成按照Revert AidTM First Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo Fisher Scientific,K1622)操作说明进行,反转录获得cDNA作为real-time PCR的模板。real-time PCR使用TB GreenTM Premix Ex Taq?Ⅱ试剂盒(Ta Ka Ra,RR820A)完成,选用谷子肌动蛋白基因Actin(Seita.8G043100.1)作为内参。反应体系20μL,包括10μL 2×SYBR Premix Ex TaqⅡ、正反向引物各0.8μL、2μL cDNA和6.4μL ddH2O。采用三步法反应程序为95℃30 s;95℃15 s,60℃30 s,72℃32 s,40个循环后收集荧光信号。每个反应3次重复,Ct取平均值,采用2-△△Ct法根据各样品在特定荧光阈值下的Ct值计算基因在不同样品中的相对表达量,与对照相比,将差异倍数≥2作为显著性差异表达的筛选标准。real-time PCR中所用引物信息见电子附表1。
图表编号 | XD00128609000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.11.16 |
作者 | 白辉、宋振君、王永芳、全建章、马继芳、刘磊、李志勇、董志平 |
绘制单位 | 河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、上海电子信息职业技术学院通信与信息工程学院、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重点实验室、河北省农林科学院谷子研究所、国家谷子改良中心、河北省杂粮重 |
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