《附表1 引物序列表:谷子抗锈病反应相关MYB转录因子的鉴定与表达》

《附表1 引物序列表:谷子抗锈病反应相关MYB转录因子的鉴定与表达》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《谷子抗锈病反应相关MYB转录因子的鉴定与表达》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

采用Trizol试剂(Thermo Fisher Scientific,15596-026),提取不同处理条件下取材的谷子样品的总RNA,第一链c DNA的合成按照Revert AidTM First Strand cDNA Synthesis Kit(Thermo Fisher Scientific,K1622)操作说明进行,反转录获得cDNA作为real-time PCR的模板。real-time PCR使用TB GreenTM Premix Ex Taq?Ⅱ试剂盒(Ta Ka Ra,RR820A)完成,选用谷子肌动蛋白基因Actin(Seita.8G043100.1)作为内参。反应体系20μL,包括10μL 2×SYBR Premix Ex TaqⅡ、正反向引物各0.8μL、2μL cDNA和6.4μL ddH2O。采用三步法反应程序为95℃30 s;95℃15 s,60℃30 s,72℃32 s,40个循环后收集荧光信号。每个反应3次重复,Ct取平均值,采用2-△△Ct法根据各样品在特定荧光阈值下的Ct值计算基因在不同样品中的相对表达量,与对照相比,将差异倍数≥2作为显著性差异表达的筛选标准。real-time PCR中所用引物信息见电子附表1。