《表1 实时荧光定量PCR引物对》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《高盐刺激可诱导巨噬细胞极化从而促进肾脏成纤维细胞的增殖及表型转化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

收集高盐处理前后的巨噬细胞，用Trizol、氯仿、异丙醇提取细胞总RNA，采用核酸分析仪测定提取RNA浓度和A260/280比值。根据实时荧光定量PCR试剂盒操作说明将RNA以25℃5 min，42℃30 min；85℃5 min的条件进行逆转录，逆转录所得产物于-80℃低温保存。采用SYBR Green法进行荧光定量PCR反应：预变性（1cycle)，95℃30 s；PCR反应（40 cycle)，95℃5 s，60℃20 s；溶解（dissociation)，55～95℃，每0.5℃10 s。分别检测M1型巨噬细胞相关基因白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和M2巨噬细胞相关基因甘露糖受体（MR）和精氨酸酶（Arg）的m RNA表达。采用2-??Ct法分析相对表达量。收集正常组及高盐组细胞培养液，用RT-q PCR检测培养液中白介素6(IL-6）及转化生长因子β（TGF-β1）的m RNA表达。引物序列如下。