《表1 CRISPR/Cas9在染色体上的敲除结果》
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《甘蓝型油菜尿卟啉原Ⅲ合成酶基因BnHemd的克隆和功能分析》
注:灰色的部分表示碱基的缺失或者插入;红字代表Cas9蛋白识别位点;“-”表示碱基的缺失;ZS11代表中双11号材料,CRI-Hemd表示编辑材料
采用农杆菌介导的方法,将植物表达载体成功转入油菜中,获得转基因抗性油菜5株。U626和U629检测引物对转化成功植株的DNA进行扩增,扩增产物转入pEASY载体中。经测序,发现在5株材料中共获得1株在靶位点发生编辑的转化植株;比对转化材料与野生型材料的测序结果(表1),发现该植株在A09和C08染色体上都发生了编辑。其中,A09染色体上是5个碱基的缺失突变,而C08染色体是一个碱基的插入。峰图正常(图5),表明测序结果较为可靠。
图表编号 | XD00179806000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.01 |
作者 | 郑潇潇、朱瑶瑶、梁华兵、詹杰鹏、师家勤、王新发 |
绘制单位 | 中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室、中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室、中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室、中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室、中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室、中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室 |
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