《表2 CRISPR/Cas9敲除MDCK细胞NPHP1脱靶位点检测的上下游引物、退火温度及产物大小》

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《基于CRISPR/Cas9技术构建NPHP1基因敲除的肾集合管上皮细胞》

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通过CRISPR在线设计工具（http://crispr.mit.edu）设计sgRNA时，根据网站生成的可能脱靶位点（8个），在犬基因组中找到对应位置，根据上下游序列设计引物（表2），通过PCR扩增和Sanger测序分析脱靶情况。