《表1 CRISPR/Cas9敲除MDCK细胞NPHP1的sgRNA序列》

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《基于CRISPR/Cas9技术构建NPHP1基因敲除的肾集合管上皮细胞》

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利用CRISPR在线设计工具（http://crispr.mit.edu），在犬NPHP1基因（Gene ID:403780）的第5外显子（SH3功能结构域的起始部分），设计3对sgRNA（表1），分别为sgRNA5、sgRNA6、sgRNA7；在sgRNA正义链（F）的5'端添加CACC、反义链（R）的5'端添加AAAC形成粘性末端，可与BbsⅠ酶酶切后的粘性末端互补。