《表1 实时荧光定量PCR引物设计》

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《FokI rs2228570和TMPRSS6 rs855791多态性与儿童牛奶蛋白过敏的相关性》

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注:*小写字母表示单核苷酸多态性位点。

使用7500/7500 Fast Real-Time PCR仪器，应用实时荧光定量PCR SNP基因分型分析。反应总体系为20μL，含10~100 ng/μL的DNA模板2μL，10μmol/L的2×Gold Star Taq Man Mixture 10μL，10μmol/L的正向引物及反向引物各0.5μL，10μmol/L的FAM及VIC探针各0.8μL，10μmol/L的50×Rox 0.2μL，纯水5.2μL。反应条件为:95℃3 min，95℃30 s，60℃30 s（40个循环）。实时荧光定量PCR引物设计如表1所示。