《表1 不同复合物的二级结构相对含量》

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《添加顺序对β-乳球蛋白与EGCG及葡萄糖三元复合物结构和功能的影响》

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远紫外CD光谱范围为178～250 nm，可以反映蛋白质等生物大分子主链的构象信息。包括α-螺旋、β-折叠以及无规卷曲等信息[30]。β-乳球蛋白包含3个转角的α-螺旋、9个β-折叠股[37]，210～220 nm之间有负峰为β-折叠。从图5可以看出，不同添加顺序形成的共价复合物的二级结构发生不同程度的改变。β-LG-EGCG-Glc con与β-LG-Glc-EGCG con的β-折叠峰都发生了蓝移，表明β-LG的β-折叠含量发生了改变。通过Dichro Web程序计算得到各复合物二级相对含量见表1。与对照蛋白相比，β-LG-EGCG-Glc con的负椭圆率增大（β-折叠增至36.4%），而β-LG-Glc-EGCG con的负椭圆率降低（β-折叠减少至32%）。同时由表1可知，这2种共价复合物无规卷曲分别增加到34.6%和35.0%。Liu Fuguo等[21]发现乳铁蛋白与绿原酸共价结合后再与葡聚糖共价结合，蛋白质的α-螺旋减少，并且无序结构增加。本实验中β-LG-EGCG-Glc con的二级含量变化趋势与Liu Fuguo等[21]研究结果一致。不同顺序形成的非共价复合物的结构呈现相同的变化趋势，β-LG-EGCG-Glc mix和β-LG-Glc-EGCG mix的β-折叠相对含量都增加，分别为36.2%和38.9%，无规卷曲相对含量则减少为27.8%和27.7%。