《表3 不同培养基对产环糊精酶的影响》

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《嗜热芽胞杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在枯草芽胞杆菌中的表达》

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为了选择适合工程菌表达α-CGT酶并可用于下步优化的出发培养基，将工程菌置于4种常见的枯草芽胞杆菌培养基中培养24h，测定细胞密度及相应环糊精酶活力（表3）。由表3可知，经TB培养基发酵后，工程菌的细胞密度及环糊精酶活力均最高，明显高于其他3种培养基，究其原因:相对LB、TSB培养基而言，TB培养基有相对较高的pH缓冲能力，稳定的pH环境更有利于菌体生长，表达更多蛋白。相对M9而言，TB含丰富的营养成分（蛋白胨、甘油等）更适合菌体生长，因此有更多的菌体生产重组环糊精酶，更有利于α-CGT酶的表达。因此最终确定TB为最优发酵培养基。在pH6.5、37℃下，进行工程菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT产α-环糊精酶培养，其菌体生长及产酶曲线如图4所示，在发酵24h胞外酶活达到最高，为5.3 U·mL-1，细胞密度达到（OD600）12.3。