《表1 引物序列：紫苏PfPDCT基因序列特征及表达分析》

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《紫苏PfPDCT基因序列特征及表达分析》

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采用EASY spin Plus多糖多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒（北京艾德莱生物科技有限公司）提取紫苏RNA，反转录参考ABM公司5X All-In-One MasterMix（with AccuRT Genomic DNA Removal Kit）反转录成c DNA。使用Premier 5.0软件设计紫苏Pf PDCT的qRT-PCR特异引物（表1），参照张玲慧[14]对紫苏内参基因的筛选结果，选择18S rRNA作为本试验的内参基因，以获得的c DNA为模板进行实时荧光定量PCR检测。应用CFX96 Real-Time PCR Detection System进行扩增，反应体系为:SYBR PremixEx TaqⅡ5μL，PCR Forward Primer 0.3μL，PCR Reverse Primer 0.3μL，DNA模板0.5μL，ddH2O 3.9μL，共10μL，3次重复。反应程序为:95℃10 min；95℃15 s，60℃1 min，共40个循环。相对表达量采用2-ΔΔCt法进行计算[14]。