《表3 不同糖苷酶的底物特异性》

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《糖苷酶在人参皂苷转化中的应用》

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F2相对C-K在3位多了一个葡萄糖基，同样具备多种抗癌以及诱导癌细胞凋亡的活性[37-39]。从表3可以看出，大部分糖苷酶同时具备3位外侧和内侧葡萄糖的水解活性，从而最终会将F2水解成C-K，因此，类似于上述Rh2的制备，制备F2需要仅水解3位外侧葡萄糖而不水解3位内侧葡萄糖的糖苷酶。表3所示的具有上述活性的4种酶中，来源于Arachidicoccus ginsenosidimutans的β-葡萄糖苷酶为通过基因组测序结合生物信息学方法找到，仅做了功能性验证，没有活性数据及应用报道[32]。其余3种均用于制备F2，其中来源于Aspergillus sp.的β-半乳糖苷酶活性较低，以pNPG为底物时酶活仅0.014 U/mg[30]，来源于Paenibacillus mucilaginosus的β-葡萄糖苷酶则没有相关酶活数据[33]，这2个酶催化Rb1转化产F2时，均不能完全转化成F2，会有部分中间产物Rd残余。来源于Aspergillus oryzae的β-半乳糖苷酶则具有较高的活性，以Rb1和Rd为底物时，酶活分别可达到124和74 U/mg，以7.57 g的Rd为底物时可以100%的转化率转化为F2，产率达到1.0 g/（L·h）[31]。除了常规的糖苷酶外，一些商品化的糖基水解酶如诺维信的Viscozyme L（包含阿拉伯聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、半纤维素酶和木聚糖酶的复合酶）、Pectinex Ultra AFP（果胶酶）、Fungamyl 800L（α-淀粉酶）等均可转化主要人参皂苷生成F2，其中Viscozyme L的转化率最高，最终HPLC检测时F2的峰面积占比可达83.6%[40]。