《表1 PMTs家族成员的底物特异性》

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《酵母O-甘露糖转移酶的研究进展》


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PMTs家族成员具有底物特异性是酵母蛋白O-糖基化人源化改造所面临的困难之一,研究者难以确定不同靶蛋白是哪一个PMTs家族成员的底物。研究者通过构建系列PMTs家族不同成员缺陷的突变株,结合分析系列靶蛋白的O-糖链,探讨其相应的特异性[24]。当PMT1基因或(和)PMT2基因突变时,壳多糖酶、Bar1p蛋白酶、热休克蛋白Pir2p/Hsp150p、α-凝集素和参与β-葡聚糖聚集的两个蛋白(Kre1p、Kre9p)等的O-糖基化会降低,而在其他PMTs家族成员的突变体中,这些蛋白却没有明显影响,说明上述蛋白是Pmt1p和Pmt2p的底物。当PMT4基因突变时,内切蛋白酶Kex2p、细胞表面蛋白Gas1p、细胞融合蛋白Fus1p、质膜蛋白Axl2p等会出现O-甘露糖化的降低或者缺失,在其他PMTs家族成员的突变中却没有明显影响,说明该系列蛋白是Pmt4p的底物(表1)。虽然PMTs家族成员呈现出不同的底物特异性,但有些酵母蛋白的O-糖基化却是由Pmt1p、Pmt2p和Pmt4p共同催化,如传感蛋白(Mid2p和WSC家族成员)[32]。然而,尽管Pmt1p、Pmt2p和Pmt4p催化同一个蛋白的O-糖基化,但是它们的作用位点却不一样[32]。