《表1 PCR扩增引物序列信息》

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《不同羽色鸡种ASIP基因SNP位点筛选及其生物信息学分析》

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从NCBI下载红色原鸡ASIP基因序列（Gen Bank登录号NC＿006107.5），使用Primer Premier 5.0设计3对特异性引物（表1），对ASIP基因第2、3和4外显子及部分内含子进行PCR扩增，扩增引物委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反应体系10.00μL:2×Taq Master Mix 5.00μL，DNA模板1.00μL，上、下游引物各0.75μL，加dd H2O补足至10.00μL。扩增程序：95℃预变性5 min；95℃30 s，61℃30 s，72℃30 s，进行35个循环；72℃延伸10 min。PCR扩增产物以1.0%琼脂糖凝胶电泳进行检测，凝胶成像系统拍照保存。PCR扩增产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司测序。