《表2 PCR扩增引物序列信息》
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《小麦新种质系SN0594春化和光周期反应特性鉴定》
利用CTAB法分别提取各品种材料基因组DNA,利用Yan、Fu等设计的STS引物,对春化基因VrnA1、Vrn-B1、Vrn-D1、Vrn-2、Vrn-B3和光周期基因Ppd-D1进行分子检测。PCR扩增引物等相关信息见表2。PCR扩增总体系为10μL,包括模板DNA 30~40 ng、10×buffer 1μL、dNTPs 150μmol·L-1、Taq DNA聚合酶1 U,引物每条5pmol。反应程序:94℃预变性10 min;94℃变性45 s,50~65℃退火30 s,延伸43~90 s,共38个循环;最后70℃延伸10 min。扩增产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)检测,定压105 V电泳3.5 h,使用0.2%的硝酸银溶液银染2 min,去离子水洗涤2次,用3%的Na OH溶液显色,最后用Tanon Gis-2010型凝胶成像系统照相观察记录分析扩增产物的片段大小。
图表编号 | XD00144332600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.04.30 |
作者 | 王东、王崇宇、徐勤省、王洪刚、李兴锋 |
绘制单位 | 山东农业大学农学院、作物生物学国家重点实验室、山东农业大学农学院、作物生物学国家重点实验室、山东农业大学农学院、作物生物学国家重点实验室、山东农业大学农学院、作物生物学国家重点实验室、山东农业大学农学院、作物生物学国家重点实验室 |
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