《表2 PCR扩增引物序列信息》

《表2 PCR扩增引物序列信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《小麦新种质系SN0594春化和光周期反应特性鉴定》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

利用CTAB法分别提取各品种材料基因组DNA,利用Yan、Fu等设计的STS引物,对春化基因VrnA1、Vrn-B1、Vrn-D1、Vrn-2、Vrn-B3和光周期基因Ppd-D1进行分子检测。PCR扩增引物等相关信息见表2。PCR扩增总体系为10μL,包括模板DNA 30~40 ng、10×buffer 1μL、dNTPs 150μmol·L-1、Taq DNA聚合酶1 U,引物每条5pmol。反应程序:94℃预变性10 min;94℃变性45 s,50~65℃退火30 s,延伸43~90 s,共38个循环;最后70℃延伸10 min。扩增产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)检测,定压105 V电泳3.5 h,使用0.2%的硝酸银溶液银染2 min,去离子水洗涤2次,用3%的Na OH溶液显色,最后用Tanon Gis-2010型凝胶成像系统照相观察记录分析扩增产物的片段大小。