《表1 GPR35野生型及突变型克隆引物序列》

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《炎性肠病易感基因GPR35在肠炎发生发展中的功能研究》

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人源GPR35有两个转录异构体，根据文献查阅及序列比对，选择GPR35a亚型作为后续研究蛋白，c DNA全长930 bp，蛋白全长309 aa。根据人源GPR35 c DNA序列设计GPR35反转录引物及突变引物，引物交由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。利用点突变试剂盒的方法构建GPR35T108M，S294R突变载体，最后将GPR35 WT，T108M及S294R序列利用常规分子生物学技术克隆至pc DNA3.1载体（V79020，Thermo Fisher，美国）中，用于后续活性研究。引物序列见表1。