《表2 AQP1 mRNA 3'UTR野生型及突变型引物序列》

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《双荧光素酶报告系统鉴定miR-204对水通道蛋白1基因的调控作用》

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设计和扩增AQP1基因野生型及突变型3'UTR，采用Primer Premier 5.0引物设计软件分别设计野生型及突变型引物（引物序列见表2），并分别在野生型上游引物和下游引物的5'端引入XhoⅠ和NotⅠ的酶切位点。采用XhoⅠ和NotⅠ双酶切后连接载体psi CHECKTM-2构建野生型及突变型重组质粒。重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆，酶切鉴定并测序后进行BLAST比对，重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆，酶切鉴定并测序，对于测序鉴定正确的含有AQP1基因3'UTR野生型或突变型重组质粒进行转染。