《表1 引物序列(5'-3')》

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《NLRP3炎性小体在Th17过度分化的皮肌炎中的作用机制》

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用TRizol将培养皿中的细胞完全裂解，收取放置在1.5 ml EP管中，静置10 min。加入500μl三氯甲烷混匀静置3 min，4℃12 000 r/min离心10 min，吸取最上层液体。加入异丙醇混匀，静置3 min，4℃12 000 r/min离心10 min，吸取上层液体后。加入DEPC水配置的75%乙醇，洗涤2次，RNA Free水溶解RNA后，检测RNA浓度、比值，将RNA浓度调整一致后，使用Fastiking c DNA dispelling RT Supermix100rxn试剂盒在PCR仪上进行逆转录合成c DNA。在96孔板中加入反应体系:SYBR Green Mix 5μl，RNA+H2O 2μl，c DNA 1μl，上游引物、下游引物各1μl。引物序列见表1。