《表1 引物序列(5'-3')》
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《癌/睾丸抗原TSP50在脂多糖刺激下引起宫颈上皮内瘤变的机制研究》
分取使用LPS刺激8 h的End1/E6E7细胞(对照组)、End1/E6E7-TSP50sh RNA细胞(TSP50sh RNA干扰组)、End1/E6E7-VEC细胞(空质粒组)。用Trizol将细胞完全裂解,静置放置10 min,4℃12 000 r/min离心3 min,取上清加入500μl三氯甲烷混匀后,静置3 min,4℃12 000 r/min离心5 min,吸取最上层液体放置于新的EP管中,加入等体积的异丙醇后混匀,4℃12 000 r/min离心10 min,吸取上层液体,使用去除RNA酶的70%乙醇清洗RNA团块后,用RNA RNase-Free水将RNA溶解,检测RNA的浓度,使用Fastiking c DNA dispelling RT Supermix100rxn试剂盒在PCR仪上进行反转录合成c DNA。在PCR板中加入SYBR Green Mix 5μl,RNA+H2O2μl,c DNA 1μl,上游引物、下游引物各1μl。引物序列见表1。采用GAPDH作为内参计算扩增数=2--△△Ct统计结果。
图表编号 | XD00229569400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.10 |
作者 | 陈星、梅双双、宋宝萍、叶丽娅、王凯、王珺 |
绘制单位 | 温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心、温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心、温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心、温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心、温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心、温州医科大学附属浙江省台州医院妇科、浙江省子宫恶性肿瘤诊治中心 |
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