《表1 引物序列信息:猪蛋白编码基因3'UTR中IRPRE1元件的鉴定及其基因特征分析》

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《猪蛋白编码基因3'UTR中IRPRE1元件的鉴定及其基因特征分析》


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参照Takara MiniBEST Universal RNA Extraction Kit说明书提取猪组织样品的总RNA,并进行DNase I处理。参照PrimeScript?II 1st Strand cDNA Synthesis Kit说明书进行反转录,对每个组织的1μg总RNA进行反转录,反转录完后用灭菌水稀释5倍,于–20℃保存。按照Golden Star T6 Super PCR Mix(1.1×)说明书进行PCR,HPRT1基因为内参基因,所有引物列于表1。引物合成与测序验证均由南京擎科生物科技有限公司完成。对3个蛋白编码基因TRMO、RCSD1和DBT的3'UTR中的IRPRE1元件进行组织表达谱分析。由于选取的IRPRE1元件位于3'UTR且都是位于单个外显子上,为了避免RNA样品中的DNA污染,利用基因组上的引物(Genome)进行PCR检测,以检测RNA样品中是否含有DNA。